【摘要】

血管钙化作为高血压、高脂血症、糖尿病和慢性肾脏疾病的并发症，并与心血管疾病有关。目前，维生素K2（VK2）延缓血管钙化的机制尚不清楚。此外，细胞凋亡过程能够调节血管平滑肌细胞（VSMC）钙化情况。因此，本研究旨在研究生长停滞特异基因6（Gas6）及其酪氨酸激酶受体Axl介导的VK2修饰的VSMC钙化和存活细胞信号转导。原代培养的血管平滑肌细胞在钙化介质中用VK2剂量依赖性地处理8天，或用/不用Axl抑制剂R428（2μmol/L）或caspase抑制剂Z-VAD-fmk（20μmol/L）预处理1小时，然后在钙化介质中用VK2（10μmol/L）或rmGas6（200 nmol/L）处理8天。用邻甲酚酞络合剂法和茜素红S染色法测定钙沉积。TUNEL和Annexin V-FITC及碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞凋亡。Western blotting检测Axl、Gas6、p-Akt、Akt和Bcl2的表达。实验结果表明，VK2显著抑制CaCl2-和β-甘油磷酸钠（β-GP）诱导的血管平滑肌细胞钙化和凋亡，这依赖于Gas6表达的恢复和Axl、p-Akt和Bcl2激活的下游信号。Z-VAD-fmk明显抑制CaCl2-和β-GP诱导的血管平滑肌细胞钙化和凋亡。增强的重组小鼠Gas6蛋白（rmGas6）表达显著降低血管平滑肌细胞钙化和凋亡。R428可抑制Gas6/Axl相互作用，从而消除VK2对CaCl2-和β-GP诱导的细胞凋亡和钙化的预防作用。这些结果表明，Gas6在VK2介导的抑制CaCl2-和β-GP诱导的血管平滑肌细胞钙化的功能中起关键作用。

【出处】 PubMed